免疫組化的局限性：在病理診斷中，隨著各種抗體新的用途不斷被發(fā)現(xiàn)及越來越多的新型抗體的出現(xiàn)，免疫組化在病理診斷和**中已有了很重要的位置，對于cancer診斷、鑒別診斷、分類及諸多方面產(chǎn)生了重大的影響。但是免疫組化技術(shù)還存在著缺陷和不足，作為病理醫(yī)生和病理技術(shù)人員不僅要充分認識到缺陷和不足，而且要努力避免由于缺陷和不足給診斷帶來的誤區(qū)，這就要求病理醫(yī)生和病理技術(shù)人員在工作中不斷學習與研究，在實際操作中總結(jié)經(jīng)驗教訓(xùn)，分析失敗原因，努力實現(xiàn)操作規(guī)范化、標準化，才能充分發(fā)揮免疫組化在病理診斷及鑒別診斷、臨床**中的指導(dǎo)作用。做免疫組化的目的是什么？大鼠免疫組化要多久

免疫組化分類中免疫酶標方法，英瀚斯生物為您介紹。免疫酶標方法是繼免疫熒光后，于60年代發(fā)展起來的技術(shù)?；驹硎窍纫悦笜擞浀目贵w與組織或細胞作用，然后加入酶的底物，生成有色的不溶性產(chǎn)物或具有一定電子密度的顆粒，通過光鏡或電鏡，對細胞表面和細胞內(nèi)的各種抗原成分進行定位研究。免疫酶標技術(shù)是目前定位準確、對比度好、染色標本可長期保存，適合于光、電鏡研究等。免疫酶標方法的發(fā)展非常迅速，已經(jīng)衍生出了多種標記方法，目前在病理診斷中廣為使用的當屬PAP法（過氧化物酶-抗過氧化物酶）、ABC法（卵白素-生物素-過氧化物酶復(fù)合物）、SP法（鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶）、即用型二步法（聚合物鏈接）等。大鼠免疫組化要多久英瀚斯生物免疫組化，高效高質(zhì)量出結(jié)果。

什么是免疫組化？免疫組化的原理是什么？

1、定義：用標記的特異性抗體對組織切片或細胞標本中某些化學成分的分布和含量進行組織和細胞原位定性、定位或定量研究，這種技術(shù)稱為免疫組織化學（immunohistochemistry）技術(shù)或免疫細胞化學（immunocytochemistry）技術(shù)。

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2、原理：根據(jù)抗原抗體反應(yīng)和化學顯色原理，組織切片或細胞標本中的抗原先和一抗結(jié)合，再利用一抗與標記生物素、熒光素等的二抗進行反應(yīng)，前者再用標記辣根過氧化物酶（HRP）或堿性磷酸酶（AKP）等的抗生物素（如鏈霉親和素等）結(jié)合，通過呈色反應(yīng)或熒光來顯示細胞或組織中化學成分，在光學顯微鏡或熒光顯微鏡下可清晰看見細胞內(nèi)發(fā)生的抗原抗體反應(yīng)產(chǎn)物，從而能夠在細胞爬片或組織切片上原位確定某些化學成分的分布和含量。

免疫組化應(yīng)該選擇石蠟切片還是冰凍切片？ 

（1）要求做冰凍切片的不一定能做石蠟切片，這是***我向一老師請教得出的結(jié)論。因為作石蠟切片時要高溫烤片，可能會破壞組織的抗原性，如果組織的抗原性較穩(wěn)定，則可作石蠟切片；但是要求做石蠟切片的，可作冰凍切片。

（2）冰凍切片的優(yōu)點是能夠較好的保存組織的抗原免疫活性，做免疫組化時不需抗原修復(fù)這一步。缺點是細胞內(nèi)易形成冰晶而破壞細胞結(jié)構(gòu)，可能會使抗原彌散；切片厚度較石蠟的厚，做的片子沒石蠟的漂亮。當你買一抗時，目錄上都寫著做什么樣的切片，如果它寫著只能做冰凍，就不能做石蠟，如寫著兩者都可，那就都能做。

（3）石蠟切片的優(yōu)點可以保持組織細胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)，且容易存放在室溫，而冰凍切片比較麻煩，一定要存在-80度的低溫冰箱中，尤其是用來做原位雜交的的切片，為了防止RNA降解，保存一貫很重要。由于石蠟切片可以切到4微米左右，所以原位雜交探針容易滲透到組織中去，容易成功，而且得到的顏色/形態(tài)都較冰凍切片好。

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病理醫(yī)師日常工作中經(jīng)常說的一句話應(yīng)該就是“做個免疫組化吧”；不管是臨床醫(yī)師，還是患者，他們問的多的問題則是“為什么要做免疫組化？”病理醫(yī)師通過“特殊染色”來進行細胞的識別。這一做法的依據(jù)是特定細胞和組織中的成分不同、則化學性質(zhì)不同，通過染色的方法則可以呈現(xiàn)不同顏色。不過，由于組織固定或儲存等，會造成相應(yīng)物質(zhì)的活性降低甚至消失，因而限制了特殊染色方法的應(yīng)用。隨著免疫學研究的進展，根據(jù)抗原與相應(yīng)抗體間特異性結(jié)合的性質(zhì)，則有了現(xiàn)在免疫組化的方法：不同細胞、不同組織中抗原有一定差異，抗體與被測組織中的特定抗原結(jié)合，進而通過一定顯色方法將結(jié)合的抗體顯示出來。如有相應(yīng)顯色，則證實可能有被測抗原；無顯色則可能無被測抗原。當然，這一方法中需注意相應(yīng)的“例外”，如抗體的非特異性結(jié)合、非特異性顯色，則容易造成“假陽性”；或者雖有相關(guān)抗原、但所用抗體與該抗原并未結(jié)合等，則容易造成“假陰性”。隨著免疫組化的應(yīng)用經(jīng)驗的增加，這些問題在常規(guī)應(yīng)用中盡量得以避免，前者如各種顯色方法的優(yōu)化；后者如抗原修復(fù)方法的優(yōu)化、新型抗體開發(fā)及選擇。免疫組化方法步驟是什么？大鼠免疫組化要多久

英瀚斯生物自有專業(yè)病理染色實驗室，可做免疫組化。大鼠免疫組化要多久

關(guān)于免疫組化的封閉：用和二抗來源一致的血清在保濕盒中于37℃孵育15~30min，然后甩去封閉用血清，勿洗；注意：封閉時間根據(jù)具體實驗調(diào)整；封閉液一般選用5%BSA或與二抗來源一致的血清，切記是BSA，不是PBS.很多論壇寫的是PBS,太坑了。①使用血清好還是BSA好？答：***是待檢樣本會非特異性的和蛋白結(jié)合，從而導(dǎo)致背景過高，因此可以用BSA或血清封閉掉這部分非特異性的結(jié)合，從這點看，BSA和血清沒有明顯區(qū)別。第二是待檢樣本中可能會有Fc受體，可以和抗體恒定區(qū)結(jié)合，與抗體特異性無關(guān)，封閉血清中有抗體，因此用血清可以封閉掉一抗及二抗和樣本Fc受體之間結(jié)合。BSA則無法封閉Fc受體。大鼠免疫組化要多久